豬偽狂犬病毒（PRV）ELISA檢測(cè)試劑盒

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被偽狂犬病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用 底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的偽狂犬病毒呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷

豬（Porcine）偽狂犬病毒（PRV）

ELISA 檢測(cè)試劑盒

使用說明書

檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被偽狂犬病毒（PRV） 抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用 底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的偽狂犬病毒（PRV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃ , 避免反復(fù)凍融， 在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1.  試劑盒保存在 2-8℃ , 使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這 屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.  濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，*終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

 

名稱	96 孔配置	48 孔配置	備注
微孔酶標(biāo)板	12 孔×8 條	12 孔×4 條	無
標(biāo)準(zhǔn)品	0.3mL*6 管	0.3mL*6 管	無
樣本稀釋液	6mL	3mL	無
檢測(cè)抗體-HRP	10mL	5mL	無
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說明書進(jìn)行稀釋
底物 A	6mL	3mL	無
底物 B	6mL	3mL	無
終止液	6mL	3mL	無
封板膜	2 張	2 張	無
說明書	1 份	1 份	無
自封袋	1 個(gè)	1 個(gè)	無

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、12.5、25、50、100、200ng/ml

試劑的準(zhǔn)備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍 干，如此洗板 5 次。

2.  自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液 350 μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

操作步驟

1.  從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50 μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本 10 μL，再加樣本稀釋液 40 μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100 μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干， 如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物 A、B 各 50 μL，37℃避光孵育 15min。

7.  每孔加入終止液 50 μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。

結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在 Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng) OD 值作縱坐標(biāo)，繪制出 標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

 

試劑盒性能

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值，大于等于 0.9900。

2.  靈敏度：檢測(cè)濃度小于 1.0 ng/ml。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。

5.  貯藏：2-8℃ , 避光防潮保存。

6.  有效期：6 個(gè)月

免責(zé)聲明

1.   試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn) 者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。

2.   嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

公司介紹：滁州仕諾達(dá)生物科技有限公司是一家以技術(shù)開發(fā)、轉(zhuǎn)讓、銷售及咨詢服務(wù)為一體的生物科技有限公司，公司主要研發(fā)銷售生物試劑，為科研客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。

公司主營(yíng)產(chǎn)品包括：標(biāo)準(zhǔn)品、染色液、elisa試劑盒、動(dòng)物血制品、試劑、抑制劑、酶相關(guān)試劑以及儀器設(shè)備等

代理品牌：Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉�。ㄎ刺峒捌放�，本公司也可以代買）

合作單位：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)研究院、北京中醫(yī)藥大學(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、江西中醫(yī)藥大學(xué)、廣州中醫(yī)藥大學(xué)、河海大學(xué)、北京腦研究中心等等

售后服務(wù)：公司以“產(chǎn)品質(zhì)量，服務(wù)至上”為企業(yè)宗旨，秉承友好共贏的合作理念，立志于為科研界老師提供我們力所能及的幫助。
如果您對(duì)我公司的產(chǎn)品及服務(wù)有興趣，期待您給我們個(gè)機(jī)會(huì)在線留言

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滁州仕諾達(dá)生物科技有限公司（Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.）位于安徽滁州，注冊(cè)資本為貳佰萬元，是家以技術(shù)開發(fā)、轉(zhuǎn)讓、銷售及咨詢服務(wù)為體的生物科技有限公司，公司主要研發(fā)銷售生物試劑，為全球科研客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。公司主營(yíng)產(chǎn)品包括：標(biāo)準(zhǔn)品、染色液、elisa試劑盒、動(dòng)物血制品、試劑、抑制劑、酶相關(guān)試劑以及儀器設(shè)備等經(jīng)銷品牌：Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉�。ㄎ刺峒捌放疲�本公司也可以代買）公司以“產(chǎn)品質(zhì)量第，服務(wù)至上”為企業(yè)宗旨，秉承友好共贏的合作理念，立志給科研界老師提供我們力所能及的幫助。如果您對(duì)我公司的產(chǎn)品及服務(wù)有興趣，期待您給我們個(gè)機(jī)會(huì)在線留言或者來電咨詢。